欧美精品av人妻,丰满少妇被猛烈进出69影院,日韩精品久久不卡中文字幕,国产日韩欧美在线一区二区三区

您好,歡迎進(jìn)入上海莼試生物技術(shù)有限公司網(wǎng)站!
全國(guó)服務(wù)熱線:13585831301
上海莼試生物技術(shù)有限公司
您現(xiàn)在的位置:首頁(yè) > 技術(shù)文章 > 大鼠晶狀體上皮細(xì)胞提取物培養(yǎng)步驟

大鼠晶狀體上皮細(xì)胞提取物培養(yǎng)步驟

瀏覽次數(shù):110發(fā)布日期:2024-07-25

大鼠晶狀體上皮細(xì)胞提取物培養(yǎng)步驟:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

1)準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號(hào)11095-080),85%;北美胎牛血清(United States,GIBCO,貨號(hào)16000-044),15%。

2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。

二.細(xì)胞處理:

1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。

2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。

3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4.將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。


Contact Us
  • 聯(lián)系QQ:3004972506
  • 聯(lián)系郵箱:sdfskdfhs3004972506@qq.com
  • 傳真:86-021-60443211
  • 聯(lián)系地址:上海嘉定區(qū)澄瀏中路3404號(hào)

掃一掃  微信咨詢

©2024 上海莼試生物技術(shù)有限公司 版權(quán)所有  備案號(hào):滬ICP備17029297號(hào)-3  技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)    GoogleSitemap    總訪問(wèn)量:94056 管理登陸

国语A在线看免费观看视频| 把腿张开老子CAO哭你动态图| 欧美在线精品一区二区在线观看| 啦啦啦WWW免费高清在线观看视频| 中文字幕被公侵犯的漂亮人妻| 国产av日韩精品一区二区| 国产精品免费无码二区| 丰满日韩放荡少妇无码视频| 国产乱子伦60女人的皮视频| 亚洲人成在线观看| 欧美日韩一区视频| 中国老妇女50XXXXHD| 她很漂亮在线观看免费韩剧| 韩国A级作爱片无码| 粉嫩小泬无遮挡久久久久久| 麻花影视电视剧豆丁网| 欧美成人一区二区三区不卡视频| 日批网站免费| 嗯男人边吃奶边做边爱视频| 中国亚洲女人69内射少妇| 久在线播放| AV无码爆乳护士在线播放| 奇米色88欧美一区二区| 麻豆久久亚洲AV成人无码电影| 黄色视频app下载| 果冻传媒独家原创在线观看| 下面一进一出好爽视频| 老熟女hdxx老小配| 欧美一区永久视频免费观看| 和表姐同居的日子小说| 菠萝蜜视频网站| XXXX性内射BBBB视| 三上悠亚在线观看| 91成人黄色片| 在线欧美精品国产综合五月| 朋友的丰满人妻| 99精品国产美女福到在线不卡| 日本理论片韩国理论片免费看| 亚洲国产欧美日韩另类| 国产免费久久精品99RE丫丫一| 亚洲AV中文无码乱人伦在线观看|